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发酵罐装入溶积60%的培养基效果怎么样

发布时间:2019.05.24     浏览次数:     资讯来源:/

发酵罐装入溶积60%的培养基(成分同种子培养基)后,将发酵罐放入灭菌釜内,在115℃下,灭菌20min。当灭菌完成后,温度降到60℃以下时,打开灭菌釜,确认发酵罐上所连接的管路完好后,将罐去除。安装pH及溶解氧等检测装置,注意各接线口不要出现差错。由于操作过程要和水打交道,故线路连接一定要注意安全,要特别注意防止漏电。发酵罐灭菌排气管为玻璃管,内装有棉花,以保证蒸汽能自由出入发酵罐,同时不会出现染菌现象。取样口上连接一段硅胶管,在硅胶管上安装节流夹,以防止培养基在灭菌是流出。

1.尽快将通气管接好,确认排气口正常后,以0.3-0.5L/min通入空气。接通冷却水管路,开搅拌在低速下进行培养基的冷却。取样与分析方法 自培养操作开始起,每3h取一次样。取样时,将取样管口流出的最初15ml左右培养液作为废液,取随后流出的培养液10ml,在OD505下测定吸光度。所得数值基于已制得的菌体量与吸光度之间的曲线,换算出菌体浓度。

2.发酵菌的空消技术发酵罐的清洗 打开罐底排污阀,用冷水冲洗罐壁,如壁内壁有沉积物,操作人员必须下罐进行人工铲除,否则易包藏杂菌成为污染源。进罐清洗必须两人进行,一人进罐清洗,一人在外监护。同时与罐体相连的取样管道,进料管道,排污管道及有关阀门都要通水冲洗干净,最好通以沸水,以提高洗涤效率,洗完后盖上入孔盖。发酵罐空消操作打开罐顶各排汽阀,开三路进汽(罐底、风管、取样管)。开始时,蒸汽以下进上出为主,蒸汽由罐底和风管进入,由罐顶所有排汽阀排出冷空气。

3.在蒸汽排出时,即关闭各阀门,稍开排汽阀,当罐压上升到时,开罐顶各排汽阀,排汽历时 15-20min,蒸汽改为上进下出为主,即关闭底部蒸汽阀,关小进风管汽阀,蒸汽主要从取样管进,连消进料管进入,空消过程中蒸汽应将两只大罐间倒种管道、压料进风管道、接种管道以及各排汽阀打开,排汽消毒(两个冲视镜阀开启短暂时间即可)。

4.保压时间到,关蒸汽阀,排汽到罐压为0kgf/cm2待进料。分过滤器灭菌 开启使用时,用从空气压站出来的常温空气对分过滤器吹风24h左右,检查无菌,即可使用。以后如果不使用,也必须保持分过滤器通常温空气,以免染菌。酵罐的实消技术进料? 空消完毕,开始进料,进料约2/3体积时,开搅拌。由于加热时物料糊化膨胀,故先不定容。当温度达到70℃时定容。

5.液化底路直接进蒸汽加热至75℃左右,关蒸汽,加入用50℃水调匀的α-淀粉酶,严防酶结块,根据生产需要,调整加入量,从进风管通入少量空气,翻腾10-15min,关闭进气。实消 用水冲洗入孔盖,盖好盖子进行实消,先将蒸汽管道内的残存水放完,然后通三路蒸汽,一路罐底,一路进风管,一路取样管,同时打开罐顶所有排汽阀门,小旋塞及压力表下的排汽旋塞,让蒸汽排出,先大后小,待罐压上升到温度121℃时,逐步关小各排汽阀门,保温保压25-30min。 保压时间到,关蒸汽,此时应即从分过滤器进无菌空气,开排气阀,关闭罐顶的所有阀门,开冷却水对发酵罐进行降温,待温度冷至35℃左右进行接种。

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